БИОХИМИЯ, 2001, том 66, вып. 5, с. 678–687
УДК 577.152.1
Ферменты нового модифицированного орто-пути Rhodococcus opacus 1CP, утилизирующего 2-хлорфенол
1 Институт биохимии и физиологии микроорганизмов им. Г.К. Скрябина PAН
2 TU-Bergakademie Freiberg, IOZ
Поступила в редакцию 20.10.2000
После доработки 05.02.2001
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: модифицированный орто-путь, хлорпирокатехин-1,2-диоксигеназа, хлормуконатциклоизомераза, хлормуконолактонизомераза, диенолактонгидролаза, 2-хлорфенол, Rhodococcus opacus 1CP.
Аннотация
Из клеток Rhodococcus opacus 1CP, утилизирующих 2-хлорфенол по 3-хлоркатехольной ветви модифицированного орто-пути, выделены и охарактеризованы хлорпирокатехин-1,2-диоксигеназа (ХПК-1,2-ДО), хлормуконатциклоизомераза (ХМЦИ), хлормуконолактонизомераза (ХМЛИ) и диенолактонгидролаза (ДЕЛГ) – ключевые ферменты нового модифицированного орто-пути. ХПК-1,2-ДО проявляла наибольшую активность с 3-хлорпирокатехином, активность с пирокатехином составила 93% активности с 3-хлорпирокатехином, а с 4-хлорпирокатехином – 50%. ХПК-1,2-ДО изученного пути обладала промежуточными физико-химическими свойствами, сочетая в себе свойства пирокатехазы обычного и хлорпирокатехазы модифицированного путей, описанных для этого штамма ранее. В отличие от изученных ранее ферментов ХМЦИ нового модифицированного пути обладала узкой субстратной специфичностью. Фермент имел Km для 2-хлормуконата 142,86 мкМ, Vmax 71,43 ед/мг, pH-оптимум в районе 6,0, температурный оптимум 65°. ХМЦИ превращала 2-хлормуконат в 5-хлормуконолактон. ХМЛИ трансформировала 5-хлормуконолактон в цис-диенолактон, который использовала как субстрат ДЕЛГ, транс-диенолактон не превращался этим ферментом. Km для цис-диенолактона составила 200 мкМ, Vmax 167 ед/мг, pH-оптимум 8,6, температурный оптимум 40°. Полученные результаты подтверждают существование нового модифицированного пути для утилизации 2-хлорфенола R. opacus 1CP.
Текст статьи
Сноски
* Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.