БИОХИМИЯ, 2001, том 66, вып. 5, с. 658–662
УДК 577.152.3
Использование тринитрофенилирования для количественной оценки протеазной и пептидазной активностей
Государственный научный центр прикладной микробиологии Министерства здравоохранения РФ
Поступила в редакцию 26.07.2000
После доработки 31.10.2000
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: : тринитрофенилирование, протеаза, пептидаза, аминогруппа, модификация.
Аннотация
Предложена чувствительная и точная методика количественной оценки протеазной и пептидазной активностей. N-Концевые аминогруппы пептидов, которые образуются при протеолизе субстратов, модифицируют тринитробензолсульфоновой кислотой (ТНБС) при pH 7,4, а тринитрофенильное (ТНФ) производное определяют спектрофотометрически. Спонтанный гидролиз ТНБС значительно уменьшается при проведении тринитрофенилирования при pH 7,4, а не 9–10, как обычно. Реакция тринитрофенилирования позволяет определить начальную скорость протеолиза, а также кинетические параметры ферментативной активности протеаз и пептидаз.
Текст статьи
Сноски
* Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.