БИОХИМИЯ, 2001, том 66, вып. 5, с. 628–639
УДК 577.152.1 + 577.152.1
Инициирование и ингибирование радикальных процессов в системах H2O2–метмиоглобин(метгемоглобин)–2,2′-азино-бис-(3-этилбензтиазолин-6-сульфокислота)
1 Институт биоорганической химии НАН Белоруссии
2 Белорусский государственный институт усовершенствования врачей МЗ Белоруссии
Поступила в редакцию 03.07.2000
После доработки 25.12.2000
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: метмиоглобин, метгемоглобин, пероксид водорода, инициирование радикалов, ингибиторы, тролокс, полидисульфид галловой кислоты, пропилгаллат, антиоксидантный статус, константы ингибирования, 2,2'-азино-бис-(3-этилбензтиазолин-6-сульфокислота).
Аннотация
При 20° в 10 мМ фосфатном буфере, pH 7,4, измерены скорости инициирования свободных радикалов в системах метмиоглобин (метгемоглобин)–H2O2 по расходованию 2,2′-азино-бис-(3-этилбензтиазолин-6-сульфокислоты) (ABTS) в виде диаммонийной соли. Каталитическая активность МетMb в этом процессе в 2–3 раза выше, чем у метгемоглобина (МетHb). Процесс описывается уравнением Михаэлиса–Ментен, по которому вычислены эффективные значения Km и Vmax. Проведено сравнительное кинетическое исследование ингибирования окисления ABTS с использованием тролокса, пропилгаллата (ПГ), полидисульфида галловой кислоты (поли(ДСГ)), полидисульфида 2-амино-4-нитрофенола (поли(АДСНФ)) и его конъюгата с сывороточным альбумином человека (САЧ-поли(АДСНФ)). Ингибиторы охарактеризованы константами ингибирования Ki и стехиометрическими коэффициентами ингибирования f (число радикалов, гибнущих на одной молекуле ингибитора). Минимальные Ki и максимальные f получены для поли(ДСГ) и в системе МетHb–H2O2–ABTS составляют 0,08 и 27,5 мкМ соответственно. По своей антирадикальной активности ингибиторы могут быть расположены в ряд: поли(ДСГ) > поли(АДСНФ) > ПГ > тролокс. Предложено использовать ПГ, поли(ДСГ), поли(АДСНФ) и его конъюгат с САЧ в качестве ингибиторов-«калибраторов» в потенциальных тест-системах антиоксидантного статуса биологических жидкостей на основе радикал-генерирующей пары МетMb–H2O2 с применением ABTS в качестве акцептора активных радикалов.
Текст статьи
Сноски
* Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.