Модифицированная декстраном гиалуронидаза резистентна к ингибированию гепарином

Аннотация

Исследованы свойства тестикулярной гиалуронидазы в нативном и модифицированным декстраном (на 98% глубину по степени блокирования поверхностных аминогрупп) виде. Оптимальная эндогликозидазная активность нативного фермента проявляется при pH 5,5 и 0,15 М NaCl. Отмечено влияние электростатических взаимодействий на активность нативного биокатализатора. Гепарин ингибирует ферментативную активность гиалуронидазы в 1,5 раза при рН 5,5 и в 1,2 раза при pH 7,5. Величина ионной силы среды слабо влияет на ингибирование биокатализатора гепарином. Показано усиление гидрофобных взаимодействий и стерических препятствий при модификации гиалуронидазы декстраном. Для ковалентно конъюгированного с декстраном биокатализатора обнаружено повышение устойчивости ферментативной активности к действию денатурантов (мочевина, гуанидингидробромид), расширение оптимальных условий функционирования (найденный оптимум эндогликозидирования pH 4,5–6,5 и 0,1–0,3 М NaCl), уменьшение значимости электростатических воздействий на активный центр фермента и его глобулу в целом, а также снижение ингибирования гепарином. При pH 7,5 оно практически не наблюдается. Отмеченная резистентность модифицированной гиалуронидазы к ингибированию гепарином обосновывает подходы к исследованию гепаринсвязывающего участка на ферментной глобуле и апробации лечебного действия стабилизированного препарата при биотерапии острых сердечно-сосудистых поражений.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: