Кинетика денатурации гликогенфосфорилазы b из скелетных мышц кролика гуанидингидрохлоридом

Аннотация

Изучена кинетика денатурации и агрегации гликогенфосфорилазы b из скелетных мышц кролика под действием гуанидингидрохлорида (GuHCl). Кривая падения ферментативной активности во времени включает участок резкого снижения активности фосфорилазы b, промежуточное плато и участок дальнейшего снижения ферментативной активности. Форма кривых инактивации фосфорилазы b под действием GuHCl меняется при варьировании концентрации фермента, что указывает на диссоциативный механизм инактивации. Диссоциация димеров фосфорилазы b на мономеры в присутствии GuHCl подтверждена измерениями коэффициентов седиментации в аналитической ультрацентрифуге. Скорость агрегации фосфорилазы b в присутствии GuHCl возрастает с увеличением концентрации денатуранта вплоть до концентрации GuHCl, равной 1,12 М; при более высоких концентрациях GuHCl наблюдается подавление процесса агрегации. При относительно малых концентрациях белка (0,25 мг/мл) агрегация на завершающих стадиях процесса протекает как мономолекулярная реакция (константа скорости реакции равна 0,082 мин^–1; 1 М GuHCl, 25°). При более высоких концентрациях фосфорилазы b (0,75 мг/мл) агрегация на завершающих стадиях процесса протекает как тримолекулярная реакция.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: