БИОХИМИЯ, 2001, том 66, вып. 4, с. 537–548
УДК 577.152.1
Стехиометрический коэффициент →H+/2e– NADH : убихинон-редуктазной реакции комплекса I субмитохондриальных частиц
Кафедра биохимии биологического факультета Московского государственного университета им. М.В. Ломоносова
Поступила в редакцию 07.06.2000
После доработки 01.11.2000
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: NADH : убихинон-редуктаза, Комплекс I, трансформация энергии, дыхательная цепь, гистерезисное поведение ферментов (митохондрии сердца быка).
Аннотация
NADH : убихинон-оксидоредуктаза (Комплекс I) катализирует трансмембранный перенос протонов из внешней среды внутрь субмитохондриальных частиц. Описан метод измерения стехиометрического коэффициента →H+/2e– для реакции окисления NADH экзогенными хинонами-акцепторами. Количественное измерение начальных скоростей окисления NADH и защелачивания внешней среды при добавлении к субмитохондриальным частицам небольших концентраций NADH в присутствии избытка водорастворимого гомолога убихинона Q1 показало, что стехиометрический коэффициент векторной реакции →H+/2e– для полностью активного NADH : убихинон-редуктазного участка дыхательной цепи равен→H+/2e–4. Термическая деактивация Комплекса I [1, 2] полностью блокирует NADH-оксидазную реакцию (естественный акцептор электронов – эндогенный убихинон) и только частично предотвращает NADH : Q1-редуктазную активность фермента. N-этилмалеимид препятствует обратимому переходу деактивированного Комплекса I в активную форму. Остаточная NADH : Q1-редуктазная активность деактивированного фермента, обработанного N-этилмалеимидом, сопряжена с трансмембранным переносом протонов со стехиометрическим коэффициентом 4. Таким образом, термодеактивация Комплекса I, так же как и присутствие специфических ингибиторов восстановления убихинона (ротенон, пиерицидин А), не приводит к потере его протон-транслоцирующей активности.
Текст статьи
Сноски
* Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.