БИОХИМИЯ, 2001, том 66, вып. 2, с. 254–260
УДК 577.353.3
Фосфорилирование белка, кодируемого первой открытой рамкой трансляции мобильного генетического элемента МДГ4 (gypsy), гомологичной и гетерологичной казеиновыми киназами типа 2
1 Институт биохимии им. А.Н. Баха РАН
2 Институт молекулярной биологии им. В.А. Энгельгардта РАН
Поступила в редакцию 07.04.2000
После доработки 22.06.2000
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: казеиновая киназа типа 2, ретротранспозон, gypsy, GAG, субстраты фосфорилирования.
Аннотация
Из ооцитов Rana temporaria и клеток Drosophila melanogaster с помощью хроматографии на гепарин-сефарозе, фосфоцеллюлозе и на колонке monoQ системы FPLC «Pharmacia» получены гомогенные препараты казеиновой киназы типа 2 (СК 2). Данная схема впервые успешно применена для очистки СК 2 из культуры клеток Drosophila melanogaster. Обнаружено, что белок, кодируемый первой открытой рамкой трансляции (ОРТ) мобильного генетического элемента МДГ4 (gypsy), in vitro является эффективным белковым субстратом как для гомологичной, так и для гетерологичной СК 2 из ооцитов Rana temporaria. При этом оба фермента катализируют включение двух молей фосфата на один моль белка. Значения Km и Vmax для реакции, катализируемой СК 2 из культуры клеток дрозофилы, составили 32,5 ± 2,1 нМ и 70,97 ± 1,89 нмоль/мин/мкг, а для СК 2 из ооцитов лягушки 37,6 ± 2,8 нМ и 66,02 ± 2,15 нмоль/мин/мкг соответственно.
Текст статьи
Сноски
* Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.