Рецептор-опосредованный перенос комплексов ДНК–галактозилированный поли-L-лизин в клетки млекопитающих in vitro и in vivo

Аннотация

В целях разработки невирусных средств доставки чужеродных генов млекопитающим изучались условия переноса бактериальных генов-маркеров lacZ и cat, а также гена аполипопротеина (Апо) A-I человека в клетки млекопитающих в виде комплексов с галактозилированным поли-L-лизином–poly(L-Lys)Gal. Бактериальные гены-маркеры использованы для подбора оптимальных условий доставки чужеродной генетической конструкции в комплексе с poly(L-Lys)Gal в культивируемые гепатомные клетки человека HepG2. Установлено, что эффективноcть доставки ДНК в клетки с помощью poly(L-Lys)Gal, оцениваемая по уровню экспрессии бактериального гена-маркера, определяется состоянием комплексов ДНК–poly(L-Lys)Gal, зависящим от ионной силы среды, в которой образуются комплексы. Кроме того, эффективность доставки комплексов зависит от молярного соотношения ДНК : галактозилированный поли-L-лизин в комплексе. Генетическая конструкция, представляющая собой плазмидный вектор экспрессии гена апо A-I человека, инъецируемая в комплексе с poly(L-Lys)Gal в хвостовую вену крысы, избирательно попадает в печень животного и переносится в клеточные ядра, где сохраняется в виде эписомы по меньшей мере неделю. Благодаря продолжительному сохранению генетической конструкции в ядрах уровень Апо A-I человека в крови крыс может быть повышен с помощью повторных инъекций. Полученные данные могут быть использованы для разработки щадящих (невирусных) подходов к генотерапии сердечно-сосудистых заболеваний.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: