Необычное поведение мембранного соматического ангиотензин-превращающего фермента в системе обращенных мицелл

Аннотация

Проведено сравнительное изучение свойств мембранной и растворимой форм соматического ангиотензин-превращающего фермента (АПФ) в системе гидратированных обращенных мицелл аэрозоля ОТ (АОТ) в октане. Обнаружена более высокая чувствительность мембранного фермента (имеющего гидрофобный пептидный якорь) по сравнению с растворимым ферментом (без якоря) к присутствию в среде анионов, изменениям pH и состава среды. Оказалось, что активность обеих форм фермента в обращенных мицеллах существенно зависит от молярности вносимого в систему буфера (Mes-Tris-буфер, 50 мМ NaCl). Растворимый АПФ проявляет максимальную активность при использовании этого буфера в концентрации 20–50 мМ, в то время как оптимум активности мембранного фермента наблюдается при более низких его концентрациях – 2–10 мМ. Гидролиз субстрата фурилакрилоил-L-фенилаланил-глицил-глицина под действием обеих форм АПФ в обращенных мицеллах при концентрации буфера более 20 мМ происходит с максимальной скоростью при pH 7,5, как и в водном растворе. Однако при более низких концентрациях буфера (2−10 мМ) мембранный фермент характеризуется pH-оптимумом активности при pH 5,5. Эти данные позволили предположить существование двух конформеров мембранного АПФ при разном составе среды в системе обращенных мицелл, различающихся по pH-оптимуму активности и величинам предельных каталитических констант. Полученные данные указывают на возможность регуляции in vivo активности мембраносвязанного соматического АПФ изменениями микроокружения.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: