БИОХИМИЯ, 2000, том 65, вып. 12, с. 1624–1633
УДК 577.152.3
Кинетика синтеза ампициллина, катализируемого пенициллинацилазой из E. coli, в гомогенных и гетерогенных системах. Количественная характеристика реакционной способности нуклеофила и математическое моделирование процесса
Научно-исследовательский институт физико-химической биологии им. А.Н. Белозерского
Поступила в редакцию 05.04.2000
После доработки 22.06.2000
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: пенициллинацилаза, синтез ампициллина, кинетические закономерности, нуклеофильность 6-АПК, математическая модель.
Аннотация
Изучены кинетические закономерности реакции ферментативного переноса ацильной группы на примере синтеза ампициллина, катализируемого пенициллинацилазой из E. coli. Показано, что реакция ферментативного синтеза ампициллина протекает через стадию образования ацилфермент-нуклеофильного комплекса, способного подвергаться гидролизу, а относительная реакционная способность (нуклеофильность) 6-АПК является сложным параметром, зависящим от концентрации нуклеофила. Проведенный кинетический анализ показал, что максимальный выход синтезируемого антибиотика зависит только от нуклеофильности 6-АПК, соотношения реакционной способности фермента по отношению к целевому продукту и донору ацильной части, и начальных концентраций реагентов. Определены значения параметров, характеризующих нуклеофильность 6-АПК, и разработан алгоритм моделирования ферментативного синтеза, позволяющий, с учетом экспериментально определенных параметров реакции, количественно предсказать и описать кинетику протекания процесса не только в гомогенных, но и гетерогенных системах вода – осадок реагентов. Показано, что проведение реакции в гетерогенной системе позволяет существенно повысить эффективность синтеза ампициллина, катализируемого пенициллинацилазой.
Текст статьи
Сноски
* Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.