БИОХИМИЯ, 2000, том 65, вып. 12, с. 1618–1623

УДК 577.152.1

Взаимодействие каталитических доменов в гибридном белке цитохром P450scc-адренодоксинредуктаза-адренодоксин, импортированном в дрожжевые митохондрии

© 2000 Л.А. Новикова 1, П.А. Назаров 1, А.С. Савельев 1, В.Л. Друца 1, В.Н. Сергеев 1, В.Л. Миллер 2, В.Н. Лузиков 1*

1 Научно-исследовательский институт физико-химической биологии им. А.Н. Белозерского, Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова

2 Отдел педиатрии и группа исследования метаболизма, Калифорнийский университет Сан-Франциско

Поступила в редакцию 13.03.2000
После доработки 28.03.2000

КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: цитохром P450scc, адренодоксин, NADPH: адренодоксинредуктаза, гибридный белок, экспрессия в дрожжах, митохондрии.

Аннотация

Сконструированы плазмиды для экспрессии в клетках Saccharomyces cerevisiae гибридного белка цитохром P450scc-адренодоксинредуктаза-адренодоксин (F2) и варианта F2 с адресующей N-концевой препоследовательностью субъединицы IV дрожжевой цитохром c-оксидазы (CoxIV). Митохондрии, изолированные из трансформированных дрожжевых клеток, содержали гибридный белок (около 0,5% общего белка) и проявляли гидроксилазную активность с 22(R)-гидроксихолестерином в качестве субстрата. Активность возрастала в 17 и 25 раз соответственно, когда к разрушенным митохондриям добавляли избыток очищенных препаратов цитохрома P450scc или смеси адренодоксина (Адх) и адренодоксинредуктазы быка (АдхРед). Предполагается, что в общей полипептидной цепи взаимодействие каталитических доменов P450scc, Адх и АдхРед затруднено.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи:

captcha

Сноски

* Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.