БИОХИМИЯ, 1999, том 64, вып. 12, с. 1628–1637
УДК 577.123
Эукариотический фактор терминации трансляции eRF1 связывается с протеинфосфатазой 2A и доставляет ее к рибосоме
Мини-обзор
Поступила в редакцию 10.07.1999
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: протеинфосфатаза типа 2А, eRFl, очистка белков, дрожжевая двугибридная система, иммунологический анализ, терминация трансляции, полисомы, клетки COS1, переходная трансфекция.
Аннотация
При очистке протеинфосфатазы типа 2А (РР2А) из скелетных мышц кролика выделены три белка: собственно фосфатаза – тример, состоящий из каталитической (РР2Ас), структурной (PR65a/Aa) и регуляторной (PR55a/Ba) субъединиц, фактор терминации трансляции первого класса (eRF1) и еще один белок с молекулярной массой 55 кДа [EMBO J., 15, 101-112]. Опыты с использованием дрожжевой двугибридной системы показали, что eRF1 взаимодействует с РР2Аса, но не взаимодействует ни с PR65a/Aa, ни с PR55a/Ba. Во взаимодействие eRF1-PP2Aca в дрожжах вовлечены N-концевой фрагмент РР2Аса, включающий 50 аминокислотных остатков, и С-концевой фрагмент eRF1, соответствующий участку, лежащему между аминокислотами 338 и 381. Присутствие комплекса eRFl-PP2Aca-PR65a/Aa в клетках COS1 показано иммунологически с использованием антител 12СА5 и экстрактов клеток COSl, трансфецированных eRFl, содержавшим дополнительный 9-аминокислотный фрагмент гемаглютинина вируса гриппа (НА). В полисомах из клетокCOS1, сверхэкспрессирующих НА-eRFl, активность РР2А в несколько раз выше, чем в полисомах из контрольных клеток. В системе in vitro не обнаружено влияния РР2Ас, а также димерного и тримерного белка РР2А на скорость терминации трансляции. Высказано предположение, что eRFl представляет собой новую субъединицу-мишень для РР2А, которая обеспечивает контакт этой фосфатазы с предполагаемым субстратом на рибосоме. Остается невыясненным, подвергаются ли дефосфорилированию участвующие в терминации белковые факторы.