БИОХИМИЯ, 1999, том 64, вып. 10, с. 1432–1436
КРАТКИЕ СООБЩЕНИЯ
УДК 577.354.44
Образование интермедиата MN (Mopen) в фотоцикле бактериородопсина дикого типа сопровождается таким же коротковолновым сдвигом максимума поглощения, как и в фотоцикле мутанта D96N
Поступила в редакцию 04.06.1999
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: бактериородопсин, фотоцикл, транспорт протона, пурпурные мембраны, Halobacterium salinarium.
Аннотация
Максимум оптического поглощения в дифференциальном спектре интермедиата М в пурпурных мембранах Halobacterium salinarium дикого типа, накапливающегося в условиях, которые благоприятствуют появлению интермедиата MN (6 М гуанидинхлорид, pH 9,6), локализован при 405-406 нм, хотя сразу после вспышки света этот максимум находится при 412 нм. В отсутствие гуанидинхлорида при pH 11,3 через 0,1 мс после вспышки максимум интермедиата М расположен при 412 нм. Через несколько миллисекунд наблюдается сдвиг максимума в коротковолновую область на 5-6 нм. Этот сдвиг похож на сдвиг максимума поглощения интермедиата М у мутанта D96N при образовании интермедиата MN (Мореп). Однако у бактериородопсина дикого типа этот сдвиг происходит, во-первых, медленнее, и сравним с переходом М в N (t1/2 ~ 2 мс), а во-вторых, наблюдается только при щелочных значениях pH, более высоких, чем рК основания Шиффа (~ 10,8 в 1 М NaCl) в бактериородопсиновых интермедиатах с депротонИрованным Asp-96. Таким образом, интермедиат MN (Мореп) с открытым обводненным входным протонным каналом обнаруживается только при высоких значениях pH, когда и основание Шиффа, и Asp-96 находятся в депротонированном состоянии. Это подтверждает наше предположение, что у интермедиата М, регистрируемого при более низких значениях pH, входной протонный канал находится в закрытом состоянии.