БИОХИМИЯ, 1999, том 64, вып. 10, с. 1301–1308
УДК 577.152.1
Флуоресценция остатков триптофана в люциферазах светляков и их комплексах с субстратами
Поступила в редакцию 13.05.1999
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: люцифераза светляков, триптофановая флуоресценция, тушение флуоресценции, люциферин, перенос энергии, АТР.
Аннотация
Исследовано тушение триптофановой флуоресценции люцифераз светляков Luciola mingrelica (единственный остаток триптофана, Trp-419) и Photinus pyralis (два остатка триптофана Trp-417, Trp-426) различными тушителями (ионы I-, Cs+, акриламид). Показано, что консервативный остаток Тгр-417(419) недоступен для заряженных частиц и вблизи него расположены как положительно, так и отрицательно заряженные аминокислотные остатки. Впервые показано, что при тушении триптофановой флуоресценции люцифераз происходит эффективный перенос энергии от триптофана к люциферину. Рассчитано расстояние между молекулой люциферина и остатком Trp-417(419): 11—15 А и 12—17 Å для люцифераз Р. pyralis и L. mingrelica соответственно. Обсуждается роль консервативного остатка Trp в катализе. АТР и АМР также являются тушителями собственной флуоресценции люцифераз. В этом случае предполагается аллостерический механизм взаимодействия Trp-417(419) с избытком АТР (АМР).