БИОХИМИЯ, 1999, том 64, вып. 9, с. 1214–1223
УДК 577.152.313
Взаимодействие предшественников мутантных щелочных фосфатаз с фосфолипидами мембран in vivo и in vitro
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: Е coli, щелочная фосфатаза, замены аминокислот, транслокация белка, фосфолипиды.
Аннотация
Предполагается, что положительно заряженные остатки аминокислот в N-концевой области сигнального пептида секретируемых белков взаимодействуют с отрицательно заряженными анионными фосфолипидами мембран при инициации секреции. Для проверки этого предположения с помощью модифицированного метода олигонуклеотид-направленного мутагенеза в N-конец сигнального пептида щелочной фосфатазEscherichia coli введены замены положительно заряженного остатка Lys-20 на незаряженный Ala или отрицательно заряженный Glu. Показано, что Lys-20 участвует во взаимодействии сигнального пептида с анионными фосфолипидами in vivo и определяет эффективность встраивания сигнального пептида изолированного предшественника в модельные фосфолипидные мембраны in vitro. Обнаружено, что эффективность встраивания сигнального пептида в липидный бислой зависит также от вязкости последнего.