БИОХИМИЯ, 1999, том 64, вып. 9, с. 1192–1196
УДК 577.355.2
Исследование структуры сопрягающего фактора CF1, связанного с тилакоидной мембраной
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: хлоропласты, сопрягающий фактор CF1; АТРаза, ATP-синтаза, структура белка, протеолиз.
Аннотация
Методами ограниченного протеолиза, денатурирующего электрофореза и последующего секвенирования исследовали структуру сопрягающего фактора CF1, связанного с тилакоидной мембраной. На N-концевом участке α-субъединицы с помощью трипсина выявлена расположенная на поверхности молекулы фермента связь R21-E22. Разрыв этой связи приводит к экспонированию связи αK24-V25. На N-концевом участке β-убъединицы идентифицирована доступная трипсину связь L14-E15. Протеолитической атаке подвергаются также связи αR140-S141, αG160-R161 и βPG102-G103. В отличие от изолированного CF1 β-субъединица связанного с мембраной фермента более чувствительна к протеолизу. В продуктах протеолиза α-субъединицы не обнаруживаются полипептиды, образующиеся при расщеплении с вязей αE17-Gl 8 и αE22-V23 изолированного CF1. Эти результаты свидетельствуют о различиях в структуре CF1 в изолированном и связанном с мембраной состояниях. Освещение тилакоидных мембран, вероятно, вследствие их энергизации приводит к маскированию ряда пептидных связей и, в частности, связиα G160-R161. Светозависимое восстановление γ-субъединицы, наоборот, вызывает увеличение доступности ряда связей, в том числе и связи αG160-R161.