БИОХИМИЯ, 1999, том 64, вып. 8, с. 1138–1142
УДК 577.152.3
Спин-меченная бактериальная рибонуклеаза из Bacillus intermedius 7P для ЭПР-исследования молекулярной динамики белка
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: ЭПР, спиновая метка, биназа, флуоресцентный анализ.
Аннотация
Определены оптимальные условия взаимодействия бактериальной рибоиуклеазы из Bacillus intermedius 7P (биназы) с бромацетамидной спиновой меткой для получения спин-меченного белка с целью исследования его молекулярной динамики методом электронного парамагнитного резонанса (ЭПР). Получена биназа селективно меченная по одной аминокислоте His-101 в активном центре в результате инкубации с меткой в течение 48 ч в фосфатном буфере, pH 5,5, при 20°. По данным флуоресцентного анализа структура спин-меченной биназы не отличается от нативной при молярном отношении белка к метке 1:3.