БИОХИМИЯ, 1999, том 64, вып. 8, с. 1052–1059
УДК 577.152.3
Влияние соосаждения и взаимодействий с анионными поверхностно-активными веществами на активность растительной фосфолипазы D
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: фосфолипаза D, ферментативная активность, поверхностно-активные вещества, соосаждение, взаимодействия, третичная структура.
Аннотация
Изучено активирующее действие на капустную фосфолипазу D двух однотипных анионных поверхностноактивных веществ (ПАВ) – додецилсульфата натрия и додецилдиоксиэтиленсульфата натрия, которые имеют схожую структуру, но различаются растворимостью кальциевых солей в водных растворах. Установлено, что отмеченное отличие не имеет важного значения, так как оба ПАВ оказывают одинаковый активирующий эффект на фосфолипазу D . Для выяснения механизма их воздействия проведено изучение фазового поведения реакционных смесей и взаимодействий ПАВ с ферментом методами потенциометрии, рассеяния света и УФ-спектроскопии. Показано, что додецилдиокеиэтиленсульфат кальция, который в отличие от додецилсульфата кальция растворим в воде, выпадает в осадок при добавлении субстрата ферментативной реакции – фосфатидилхолина. В реакционных смесях происходит включение фосфолипазы D в осадок, составленный из кальциевых солей ПАВ и фосфатидилхолина, что можно рассматривать как иммобилизацию фермента. Кроме того, ПАВ связываются ферментом, вызывая развертывание глобулы белковой молекулы в результате электростатического отталкивания между сорбированными поверхностно-активными анионами. Наблюдаемый рост функциональной активности фосфолипазы D объяснен переходом к оптимальной третичной структуре белка в ходе последовательных конформационных переходов, индуцируемых ПАВ.