БИОХИМИЯ, 1999, том 64, вып. 8, с. 1013–1021
УДК 577.151
Новые методы очистки белков. Аффинная ультрафильтрация
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: очистка белков, аффинная ультрафильтрация, макролиганд, аффинный латекс.
Аннотация
В обзоре обсуждается новый метод очистки белков – аффинная ультрафильтрация. При аффинной ультрафильтрации очищаемый белок образует комплекс с макролигандом, состоящим из растворимого полимера или нерастворимой микрочастицы с ковалентно связанными аффинными лигандами, специфичными к данному белку. Образовавшийся комплекс задерживается мембраной, в то время как примесные белки проходят через мембрану и удаляются с потоком жидкости. Затем в систему подают элюент, целевой белок диссоциирует из комплекса с микролигандом и проходит через мембрану, а макролиганд задерживается мембраной и после регенерации используется вновь. Коммерческая доступность ультрафильтрационных систем различного устройства и высокой производительности наряду с наличием как уже синтезированных макролигаидов, так и возможностью их простого получения на основе коммерческих латексов, – все это делает аффинную ультрафильтрацию привлекательной альтернативой другим методам очистки белков. Аффинная ультрафильтрация отличается возможностью быстро перерабатывать большие объемы растворов и использовать одно и то же оборудование для очистки различных белков простотой масштабирования и автоматизации.