БИОХИМИЯ, 1999, том 64, вып. 4, с. 459–465
УДК 577.152.3
Выделение и первичная характеристика амидазы из Rhodococcus rhodochrous
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: Rhodococcus rhodochrous, амидаза, выделение, свойства, специфичность.
Аннотация
Амидаза (КФ 3.5.1.4) выделена в гомогенном виде из штамма Rhodococcus rhodochrous М8 с помощью фракционного осаждения изопропиловым спиртом и анионообменной хроматографии на Mono Q.Амидаза состоит из четырех идентичных субъединиц с молекулярной массой 42 ± 2 кДа. Фермент проявляет наибольшую активность при 55-60° в диапазоне pH от 5 до 8. Амидаза полностью ингибируется ионами тяжелых металлов – характерными реагентами на сульфгидрильную группу. Комплексоны – ЭДТА и o-фенантролин, а также ингибиторы сериновых протеиназ (PMSF и DIFP) не ингибируют фермент.Амидаза проявляет гидролитическую и ацилтрансферазную активность. Лучшими субстратами для амидазы R. rhodochrous М8 являются алифатические амиды – ацетамид и пропионамид. Фермент с низкой скоростью гидролизует объемные ароматические амиды и не обладает уреазной активностью. По ряду свойств выделенный фермент близок к амидазе из Arthrobacter sp. J-1 и амидазе с «широкой специфичностью» из Brevibacterium sp. R312.