БИОХИМИЯ, 1999, том 64, вып. 2, с. 267–273
УДК 577.152.3
Выделение, очистка и свойства аминопептидазы H из скелетных мышц ящерицы Agama stellio stellio
Поступила в редакцию 26.06.1998
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: аминопептидаза Н, мышцы, ящерица, Agama stellio stellio.
Аннотация
Впервые из скелетных мышц представителя класса рептилий – ящерицы Agama stellio stellio – выделена и очищена аминопептидаза Н путем хроматографии на ДЭАЭ-целлюлозе, Ультрогеле АсА 34, активированной тиол-Сефарозе 4В, фенил-Сефарозе CL-4B и повторной хроматографии на ДЭАЭ-целлюлозе. По данным электрофореза в полиакриламидном геле в присутствии Ds-Na очищенный фермент мигрирует как единственный полипептид с молекулярной массой 48 кДа, а по данным гель-фильтрации на Ультрогеле АсА34 молекулярная масса фермента составляет 384 кДа. Оптимальной значение pH для гидролиза L-лейцин-2-нафтиламида (LeuNap) составляет 7,8. Величины Кт для гидролиза LeuNap и N-бензоил-D,L-аргинин-β-нафтиламида равны 0,48 и 0,99 мМ соответственно. Активность фермента в значительной степени ингибируется иодацетатом и лейпептином, но не чувствительна к действию ЭДТА, пепстатипа, бесгатина и фенилметилсульфонилфторида. Фермент не гидролизует такие белки, как гемоглобин, БСА, белки миофибрилл и саркоплазмы.