БИОХИМИЯ, 1999, том 64, вып. 2, с. 212–218
УДК 577.153.3.
Стабилизация фермент-субстратного соединения мутантной формы неорганической пирофосфатазы Escherichia coli Asp-67Asn ионами фтора
Поступила в редакцию 09.06.1998
После доработки 26.06.1998
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: неорганическая пирофосфатаза, Escherichia coli, ингибирование фторидом, фермент-субстратный комплекс.
Аннотация
Инкубация мутантной формы неорганической пирофосфатазы Е. coli Asp-67Asn с NaF в условиях насыщающих концентраций субстрата и металла-активатора сопровождается постепенным уменьшением начальной скорости гидролиза PPi. Главной особенностью реакции является ее двухстадийный характер. На первой стадии мгновенно образуется комплекс, содержащий фермент, пирофосфат, ионы магния и фторид, после чего происходит медленное изменение его конформации. Фермент-субстратное соединение, стабилизированное фторидом, обладает частичной ферментативной активностью и может быть выделено при удалении избытка фторида гель-фильтрацией.