БИОХИМИЯ, 1999, том 64, вып. 2, с. 201–211
УДК 577.154
Кинетика взаимодействия киназы фосфорилазы из скелетных мышц кролика с гликогеном
Поступила в редакцию 16.06.1998
После доработки 21.09.1998
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: киназа фосфорилазы, гликоген, турбидиметричсский метод, гликогенфосфорилаза, аналитическое ультрацентрифугирование.
Аннотация
Кинетика взаимодействия киназы фосфорилазы из скелетных мышц кролика с гликогеном изучена с использованием турбидиметрического метода при pH 6,8 и 8,2. Показано, что начальная скорость процесса комплексообразования прямо пропорциональна концентрации фермента и концентрации полисахарида,что указывает на образование комплекса со стехиометрией 1:1 на начальном этапе связывания киназы фосфорилазы гликогеном. Кинетические данные указывают на то, что субстрат киназы фосфорилазы – гликогенфосфорилаза b благоприятствует связыванию киназы фосфорилазы гликогеном. Это заключение подтверждено прямыми опытами по изучению влияния фосфорилазы b на взаимодействие киназы фосфорилазы с гликогеном методом седиментационного анализа. Кинетические кривые комплексообразования киназы фосфорилазы с гликогеном, полученные в присутствии А’ГР, характеризуются наличием лаг-периода. Показано, что преинкубация киназы фосфорилазы с АТР в присутствии ионов Са2+ и Mg2+ приводит к полному исчезновению лаг-периода. При переходе от pH 6,8 к pH 8,2 скорость связывания киназы фосфорилазы гликогеном заметно возрастает, причем комплексообразованис становится возможным даже в отсутствие ионов Mg2+. Предложена модель адсорбции киназы фосфорилазы и фосфорилазы b на поверхности гликогеновой частицы, объясняющая увеличение прочности связывания киназы фосфорилазы с гликогеном в присутствии фосфорилазы b,