БИОХИМИЯ, 1999, том 64, вып. 1, с. 99–105
УДК 577.152.3
Выделение и некоторые свойства тимидилаткиназы морского ежа
Поступила в редакцию 02.03.1998
После доработки 05.10.1998
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: морской еж, тимидилаткиназа, очистка, свойства.
Аннотация
Из яйцеклеток морского ежа Strongylocentrotus intermedius выделена тимидилаткиназа (КФ 2.7.4.9, АТP : dTMP-фосфотрансфераза). Ферментный препарат очищен в 1073 раз и не содержит примесей фосфатазы и АТРазы. Молекулярная масса тимидилаткиназы из морского ежа составляет 100 кДа, оптимум pH 8-8,5. Для проявления максимальной активности фермента необходимо присутствие 2-5 мМ АТР, 10 мМ MgCl2, Ионы, Mg2+ могут частично заменяться в реакции фосфорилирования dTMP ионами других двухвалентных металлов, эффективность которых падает в ряду: Mg2+ > Mn2+ > Са2+ = Cd2+ = Сo2+, а в присутствии ионов Zn2+, Fe2+, Сu2+, Pb2+ активность тимидилаткиназы морского ежа не проявляется. В качестве донора фосфатной группы тимидилаткиназа из яйцеклеток морского ежа использует ATP, dCTP и dTTP. Акцепторами фосфата может быть как dTMP, таки dCMP. Добавление в реакционную смесь тимидина и других нуклеозидов практически не влияет на скорость реакции фосфорилирования dTMP.