БИОХИМИЯ, 1999, том 64, вып. 1, с. 25–33
УДК 577.122
Аффинная очистка Alu-связывающих белков из соматических клеток человека
Поступила в редакцию 22.06.1998
После доработки 28.08.1998
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: сайт-специфическое ДНК-белковое связывание, Alu-повторы, Alu-связывающие белки.
Аннотация
Сообщается о выявлении в нуклеоплазме соматических клеток человека белка с молекулярной массой 66 кДа, специфически связывающего ДНК Alu-повторов. Использованы методы ретардации в геле, саузвестернблота и аффинной очистки белков на иммобилизованной ДНК. При аффинной очистке с Alu-повторами связывается еще один белок с молекулярной массой 60 кДа. Скорее всего это связывание обусловлено белок-белковыми взаимодействиями. Картина ретардации в геле свидетельствует об образовании множественных комплексов с экспоненциальной зависимостью подвижности Alu-белковых комплексов. Сайт связывания белка 66 кДа с Alu-повтором определен с помощью синтетических олигонуклеотидов. Он расположен между А- и В-боксами промотора РНК полимеразы III и совпадает с сайтом связывания белка 60 кДа из сперматозоидов человека. На основании совпадения методов выделения, а также совпадения сайтов связы-вания и сходства молекулярных масс предполагается, что Alu-связывающие белки половых и соматических клеток гомологичны. Обсуждаются взаимоотношения Alu-связывающих белков, описанных в настоящей работе, с Alu-связывающими белками, выявленными ранее в работах различных авторов,