БИОХИМИЯ, 1998, том 63, вып. 12, с. 1654–1661
УДК 577.152.1
Образование и распределение модифицированного FAD между изоформами алкогольоксидазы метилотрофных дрожжей Рichia methanolica
Поступила в редакцию 13.02.1998
После доработки 22.04.1998
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: метилотрофные дрожжи, Pichia methanolica, Hansenula polymorpha, изоформы алкогольоксидазы, модификация FAD.
Аннотация
Показано, что содержание модифицированного (m) FAD в изоформах алкогольоксидазы (АО) метилотрофных дрожжей Pichia methanolica МН4 увеличивается в динамике роста культуры или при снижении скорости протока среды. При этом, чем меньше электрофоретическая подвижность изоформы фермента, тем выше в ней содержание mFAD. Результаты экспериментов in vitro и наличие mFAD у дефектных по АО мутантов Hansenula polymorpha DL-1 указывают на вероятное биосинтетическое происхождение данного кофактора. ВЭЖХ анализ субъединичного состава 1,5 и 9 изоформ, а также анализ пептидного состава триптических гидролизатов 1 и 9 изоформ АО Pichia methanolica МН4 показал, что изоформы 1 и 9 являются гомоолигомерами, состоящими из различных α- и (β-субъединиц соответственно. Изоформа 5 и другие изоформы (кроме 1-й и 9-й), представляют собой гетероолигомеры, состоящие из обоих типов субъединиц, ассоциированных в различных соотношениях в октамерной структуре АО. Обсуждается возможный меха-низм образования mFAD и его распределение между изоформами АО.