БИОХИМИЯ, 1998, том 63, вып. 11, с. 1543–1550
УДК 678.01:577.15.02
Комплексы полиэтиленгликоля с белками
Поступила в редакцию 11.02.1998
После доработки 05.06.1998
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: α-химотрипсин, полиэтиленгликоль, полимер-белковые комплексы, высокие давления, ферментативные свойства, круговой дихроизм, седиментация.
Аннотация
Показана возможность получения нековалентных аддуктов между полиэтиленгликолем (ПЭГ) и белками (α-химотрипсином (XT), лизоцимом и БСА) под действием высокого давления. Наличие полимерных цепей в составе комплекса доказано использованием 3Н-меченого ПЭГ. Состав комплекса с XT (число молекул полимера на одну молекулу белка) зависит от молекулярной массы ПЭГ, уменьшаясь на порядок при переходе от ПЭГ300 к ПЭГ4000. При этом весовая доля белка в комплексах не зависит от молекулярной массы ПЭГ и составляет ~70 вес.%. Каталитические константы гидролиза этилового эфира N-бензоил-L-тирозина и азоказеина комплексами ПЭГ-X T идентичны соответствующим величинам для нативного XT. Данные КД свидетельствуют о полном сохранении вторичной структуры XT в комплексах с ПЭГ. Для оценки доступности полимерных цепей ПЭГ в составе комплексов изучена способность полимеров образовывать комплексы включения с α -циклодекстрином (α-ЦД). Показано, что доля полимерных цепей в комплексах ПЭГ-XT, взаимодействующих с α-ЦД, составляет ~ 10%. На основании полученных данных предложена модель комплексов ПЭГ-XT, в соответствии с которой сорбция ПЭГ осуществляется за счет многоточечного взаимодействия с поверхностью белковой глобулы вдали от области активного центра и приводит к значительному уменьшению подвижности полимерных цепей.