Новые методы очистки белков. Вытеснительная хроматография

Аннотация

Обзор обсуждает новый метод очистки белков – вытеснительную хроматографию. Элюция связанных с сорбентом белков в вытеснительной хроматографии достигается за счет присутствия в элюенте вещества – так называемого «вытеснителя», – которое обладает большим сродством к сорбенту, чем любой из адсорбированных на нем белков. Адсорбированные белки как бы «выталкиваются» вытеснителем, образуя последовательность зон элюции при движении вдоль колонки. Первым движется компонент с наименьшим, а последним – компонент с наибольшим сродством к сорбенту. Концентрация отдельного компонента в каждой зоне определяется точкой пересечения операционной линии и изотермы адсорбции данного компонента. Зоны элюции имеют форму, близкую к прямоугольной. Достигается более высокое разрешение по сравнению с другими методами селективной элюции, особенно в условиях высоких нагрузок на колонку, когда используется практически вся динамическая емкость носителя. Независимость концентрации компонента в зоне элюции от его содержания в исходном растворе позволяет успешно концентрировать очищаемый белок с помощью вытеснительной хроматографии. Рассмотрены практические примеры использования вытеснительной хроматографии для разделения модельных белковых смесей и очистки белков из различных источников. Обсуждаются методы регенерации сорбентов, используемых в вытеснительной хроматографии.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: