БИОХИМИЯ, 1998, том 63, вып. 10, с. 1391–1399
УДК 577.152.3
Остатки триптофана в α-галактозидазе из Тrichoderma reesei
Поступила в редакцию 11.11.1997
После доработки 02.02.1998
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: α-галактозидаза, Trichoderma reesei, активный центр фермента, SH-rpyппa, флуоресцентная спектроскопия.
Аннотация
Проведена модификация триптофановых остатков α-галактозидазы бромсукцинимидом. Отсутствие защитного эффекта галактозой, специфического ингибитора α-галактозидазы, означает, что остатки триптофана не расположены в сайтах сорбции галактозы. Изучение кинетики инактивации показало наличие двух групп остатков Тгр (8,5 и 7,5) с разной степенью доступности для бромсукцинимида. Изучено специфическое тушение флуоресценции α-галактозидазы в результате модификации сульфгидрильной группы активного центра фермента ионами Hg2+ и Ag+. Установлено, что причиной специфического тушения является конформационная перестройка молекулы фермента. Определены радиусы Ферстера комплексов белка с различными хромофорами. Изучено динамическое тушение флуоресценции α-галактозидазы. Предложена модифицированная форма уравнения Штерна-Фольмера, описывающая аномальное динамическое тушение в α-галактозидазе.