БИОХИМИЯ, 1998, том 63, вып. 10, с. 1349–1361
УДК 577.152.1
Взаимодействие стероидных конъюгатов пероксидазы с иммуносорбентами на основе целлюлозы в водной и мицеллярной средах
Поступила в редакцию 22.09.1997
После доработки 06.02.1998
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: конъюгаты пероксидазы со стероидами, кортизол, прогестерон, антитела против стероидов, иммобилизованные антитела, иммуносорбенты, иммунокомплексы, константы диссоциации иммунокомплексов, обращенные мицеллы, микроэмульсии, взаимодействие антиген-антитело, ферменты в нетрадиционной среде.
Аннотация
В 0,1 М бикарбонатном буфере, pH 9, а также в микроэмульсиях аэрозоля ОТ (АОТ) и его смеси с тритоном Х-45 в гептане, антитела против кортизола (анти-КОР) и прогестерона (анти-ПРОГ) ковалентно иммобилизованы на узкопористых целлюлозных фильтрах диаметром 0,6 см после их окисления в реакции с периодатом натрия. Полученные в разных средах иммуносорбенты охарактеризованы по плотности связанных с ними антител и антигенсвязывающей способности по отношению к пероксидазным конъюгатам стероидов ПХ-KOР-11 и ПХ-ПРОГ-4, содержащим 11 молекул кортизола и четыре молекулы прогестерона соответственно. Для всех иммуносорбентов сравнена антигенсвязывающая способность, выраженная в терминах пероксидазной активности иммунокомплексов, сформированных на твердой целлюлозной матрице в водной и мицеллярной средах. Методом твердофазного иммуноферментного анализа определены и сравнены между собой среднечисловые константы диссоциации иммунных комплексов на целлюлозном носителе, сформированных в водной и мицеллярной средах. Во всех случаях величины Кd в водной среде имеют порядок ~10 8 М и значительно ниже значений констант диссоциации иммунокомплсксов в смешанных микроэмульсиях АОТ и тритона Х-45.