БИОХИМИЯ, 1998, том 63, вып. 10, с. 1332–1338
УДК 577.27
Анализ антител, распознающих В-эпитопы, которые формируются на белковых антигенах при их обработке глутаровым альдегидом, и эффективный способ их нейтрализации
Поступила в редакцию 20.11.1997
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: глутаровый альдегид, В-эпитопы, сформированные глутаровым альдегидом, пептид-белковые конъюгаты.
Аннотация
Проведен иммунохимический анализ антигенных детерминант (АД), которые формируются на белковых макромолекулах после их обработки глутаровым альдегидом (ГА) с последующим блокированием свободных альдегидных групп глицином. Для анализа строения таких эпитопов использовали БСА и овальбумин (Ова), обработанные соответствующим образом глутаровым альдегидом с последующим блокированием активных групп глицином и другими аминокислотами. В качестве гаптеноподобных антигенов, имитирующих глутаральдегидные антигенные детерминан ты (ГА-АД), использовались продукты реакции глутарового альдегида с Gly, Lys, Pro и His. Непрямой и конкурентный иммуноферментный анализ совместно с иммуиоаффинной хроматографией выявили два участка эпитопной плотности в структуре глутаральдегидной детерминанты. Показано, что продукт реакции Gly с глутаровым альдегидом (ГА-Gly) эффективно блокировал антитела, направленные к обработанным глутаровым альдегидом белкам. На основе ГА-Gly предложен метод определения пептид-специфических антител в составе иммунных комплексов с пептид-белковым конъюгатом в присутствии антител к сшивающему агенту.