БИОХИМИЯ, 1998, том 63, вып. 9, с. 1243–1250
УДК 577.112.826
Частичная аминокислотная последовательность глиадина γ-46
Поступила в редакцию 04.12.1997
После доработки 06.05.1998
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: запасные белки, проламины, глиадины, остатки цистеина, цистеинсодержащие пептиды, масс-спектрометрия.
Аннотация
Нами впервые установлена частичная аминокислотная последовательность глиадина γ-46 (207 аминокислотных остатков), выделенного из пшеницы сорта Харди. Относительная молекулярная масса (Мг) белка, равная 35191,3, была определена масс-спектрометрией с ионизацией белка электрораспылением. Число остатков цистеина в глиадине γ-46 было установлено путем определения разницы молекулярных масс белка до и после его восстановления и алкилирования 4-винилпиридином. Показано, что в белке нет свободных SH-групп, а все восемь остатков цистеина вовлечены в образование четырех дисульфидных связей. Частичная структура глиадина γ-46 была определена путем секвенирования его N -концевой аминокислотной последовательности, а также триптических и химотриптических пептидов. Триптические пептиды получены путем ферментативного гидролиза белка, который предварительно восстанавливали и иммобилизовали по остаткам цистеина на тиопропилсефарозе 6В. Химотриптические пептиды выделены в результате ограниченного гидролиза нативного белка. Положения остатков цистеина, как и аминокислотные последовательности в их окружении, в глиадине γ-46 являются консервативными, что характерно для семейства глиадинов.