БИОХИМИЯ, 1998, том 63, вып. 8, с. 1116–1128
УДК 577.353.2
Калориметрические исследования тепловой денатурации фрагментов миозина гладких мышц и их комплексов с ADP и аналогами фосфата
Поступила в редакцию 05.03.1998
После доработки 23.03.1998
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: дифференциальная сканирующая калориметрия, миозин, субфрагмент 1, субфрагмент 2, тяжелый меромиозин, легкие цепи, фосфорилирование, гладкие мышцы.
Аннотация
Методом дифференциальной сканирующей калориметрии (ДСК) исследовали тепловую денатурацию суб-фрагмента 1 миозина (S1) и тяжелого меромиозина (НММ) из гладких мышц мускульного желудка индей-ки в отсутствие добавленных нуклеотидов, в присутствии ADP и в стабильных тройных комплексах S 1 или НММ с ADP и аналогами Рi – ортованадатом (Vi), фторидом бериллия (BeFx или фторидом алюминияn (А1F-4). Показано, что образование этих тройных комплексов вызывает значительные конформационные изменения в S1 или в головках НММ, которые выражаются в заметном увеличении термостабильности белка. Эффект BeFx был выражен существенно слабее, чем эффекты Vi или AIF-4. Фосфорилирование регуляторных легких цепей (RLC) в S1 или в НММ не оказывало существенного влияния на эти эффекты. В целом изменения, вызываемые различными аналогами Pi в S1 и в НММ гладких мышц, были сходны с изменениями, наблюдавшимися ранее для S1 из скелетных мышц кролика, не содержащего RLC. Сделан вывод, что RLC и их фосфорилирование не оказывают существенного влияния на характер структурных перестроек, происходящих в моторных доменах головок НММ при образовании тройных комплексов HMM-ADP-Vi, HMM-ADP-AIF-4 и HMM-ADP-BeFx – стабильных аналогов промежуточных состояний АТРазной реакции НММ (НММ ∙ ADP ∙ Рi и НММ • АТР).