БИОХИМИЯ, 1998, том 63, вып. 6, с. 852–858
УДК 577.125
Фосфорилирование липидов, прочно связанных с секреторным иммуноглобулином А, в препаратах антител из молока человека, обладающих протеинкиназной активностью
Поступила в редакцию 03.11.1997
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: молоко человека, абзимы, липиды, протеинкиназная активность, самофосфорилирование.
Аннотация
Обнаружено, что препараты антител (АТ), содержащие только sIgA и IgG, полученные из молока человека хроматографий на Protein A-Sepharose, катализируют фосфорилирование казеина в присутствии [γ-32Р]АТР. Параллельно с этим происходит образование 32Р-меченных низкомолекулярных продуктов небелковой природы, распределяющихся по дорожкам полиакриламидного геля в виде радиоактивного фона при электрофорезе АТ в денатурирующих условиях. При очитке sIgA от IgG на DEAE-сорбенте и последующей гель-фильтрации в 0,05 М NaOH часть низкомолекулярных соединений остается прочносвязанной с sIgA и отделяется только при гель-фильтрации белка с использованием буфера, содержащего 5% диоксана (мягкое удаление), или экстракции осадка sIgA смесью хлороформ : метанол (2 : 1). 32Р-Меченные соединения разделялись ТСХ в системе, используемой для разделения фосфолипидов, на две фракции (Rf 0,83 и 0,66) и окра шивались парами иода. Полученные данные свидетельствуют о липидной природе совыделяющихся с sIgA соединений. При концентрации АТР 25 нМ включение 32Р-метки происходит в казеин и в липиды. При повышении концентрации АТР до 1 мкМ наряду с этими субстратами фосфорилируются полипептиды sIgA. Мягкое удаление липидов из препаратов АТ увеличивает включение 32P в казеин и полипептиды sIgA. Учитывая гетерогенность поликлональных sIgA по сродству к белкам и АТР, сделано предположение о том, что фосфорилирование казеина и полипептидов sIgA катализирует абзимы различного клонального происхождения.