БИОХИМИЯ, 1998, том 63, вып. 6, с. 842–851
УДК 577.111
Взаимодействие агглютинина зародышей пшеницы и конканавалина A с тромбоцитами. Cтимуляция функциональных реакций тромбоцитов и связывание с мембранными гликопротеинам
Поступила в редакцию 05.01.1998
После доработки 13.02.1998
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: тромбоциты, агрегация, адгезия, мембранные гликопротеиды, лектины, агглютинин зародышей пшеницы, конканавалин А.
Аннотация
Исследовали эффекты лектинов – агглютинина зародышей пшеницы (Wheat Germ Agglutinin, WGA) и конканавалина A (Concanavalin A, Con А), на функциональные реакции тромбоцитов и взаимодействие лектинов с мембранными тромбоцитарными гликопротеинами (ГП). Оба лектина стимулировали агрегацию тромбоцитов и секрецию серотонина из тромбоцитарных гранул. Эффекты WGA и Con А блокировались N-ацстил-D-глюкозамином и α-метил-D-маннопиранозидом соответственно, а также активатором аденилатциклазы, простагландином Е1, и моноклональным антителом (монAT), CRC64, против ГП IIb-IIIа, ингибирующим взаимодействие тромбоцитов с фибриногеном. Полученные данные указывают на то, что оба лектина, взаимодействуя с углеводными компонентами поверхности тромбоцитов, стимулируют не пассивную агглютинацию, а фибриноген/ГП IIb-IIIа-зависимую агрегацию тромбоцитов, сопряженную с секрецией из гранул и активацией внутриклеточных систем передачи сигналов. Однако в стимулирующих эффектах лектинов были обнаружены и существенные различия. WGA индуцирует более выраженную и быструю агрегацию, чем Con А, и в несколько раз более эффективно стимулирует секрецию серотонина. Исследования адгезии тромбоцитов показали, что сорбированный на пластике WGA является неадгезивным субстратом, в то время как Con А эффективно стимулирует адгезию тромбоцитов. В отличие от Con А-индуцированной агрегации, адгезия к Con А не ингибировалась монАТ CRC64, т.е. не зависела от взаимодействия ГП IIb-IIIа с фибриногеном. Связывание лектинов с главными ГП тромбоцитов изучали, используя иммобилизованные на пластике WGA и Con А и лизат тромбоцитов в качестве источника ГП. После инкубации лизата с лектинами связывание отдельных ГП оценивали с помощью специфических моно- или поликлональных антител. WGA связывался преимущественно с ГП Ib и с Р-селектином и, в существенно меньшей степени, либо вообще не связывался с другими ГП. Связывание Con А с тромбоцитарными ГП было менее специфично – этот лектин взаимодействовал с ГП IIb-IIIа, ГП Ib, ГП IV и Р-селектином. Несмотря на то что WGA связывается на поверхности тромбоцитов преимущественно с ГП Ib, антитела против этого белка не влияли на WGA-индуцированную агрегацию, хотя и ингибировали WGA-индуцированную агглютинацию фиксированных тромбоцитов. Таким образом, взаимодействие WGA с ГП Ib, по-видимому, не является главным стимулом, инициирующим WGA-зависимую активацию и последующую агрегацию тромбоцитов.