БИОХИМИЯ, 1998, том 63, вып. 6, с. 812–819
УДК 577.352.4
Влияние эозина Y на каталитическую и функциональную активность Mg2+, ATP-зависимого кальциевого насоса плазматической мембраны гладкомышечных клеток
Поступила в редакцию 16.10.1997
После доработки 03.03.1998
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: Са2+, Mg2+-ATPa3a, кальциевый насос, эозин Y, плазматическая мембрана, гладкомышечные клетки, миометрий.
Аннотация
В опытах, проведенных на препаратах высокоочищенной Ca2+,Mg2+-ATPaзы, солюбилизированной из сарколеммы, и фракции инвертированных сарколеммальных везикул, исследованы кинетические закономерности ингибирующего влияния эозина Y (0-100 мкМ) на каталитическую и транспортную активность Мg2+,АТР-зависимого кальциевого насоса плазматической мембраны клеток миометрия. Установлено, что, как в случае реакции Са2+,Мg 2+-зависимого ферментативного гидролиза АТР, так и в случае процесса Mg2+, ATP-зависимой аккумуляции Са2+, значение кажущейся константы ингибирования Кi составляло 0,8 мкМ. Между тем эозин Y, примененный в концентрации до 100 мкМ, абсолютно не влиял на Na+-Ca2+-o6мен во фракции плазматических мембран. Этот ингибитор уменьшал число оборотов очищенной Са2+, Mg2+-АТРазы, определяемое как по Mg2+, так и по АТР. В то же время в присутствии данного вещества сродство очищенной Са2+, Мg2+-АТРазы к Mg2+ увеличивалось, а к АТР – снижалось. В случае же Mg2+, АТР-зависимого транспорта Са2+ эозин Y снижает число оборотов кальциевого насоса, сродство же последнего к Mg2+ и АТР практически не зависело от присутствия ингибитора в среде инкубации. Обсуждается возможность использования эозина Y в модельных экспериментах с целью идентификации Mg2+, ATP-зависимого и Na+-зaвисимого кальциевых потоков из гладкомышечных клеток во внеклеточную среду.