БИОХИМИЯ, 1998, том 63, вып. 6, с. 737–743
УДК 577.112.023
Новые методы очистки белков. Хоматография в расширяющемся слое
Обзор
Поступила в редакцию 29.10.1997
После доработки 12.12.1997
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: очистка белков, аффинная хроматография, хроматография в расширяющемся слое.
Аннотация
В обзоре обсуждается новый метод очистки белков – хроматография в расширяющемся слое (РС-хроматография). В основе метода лежит подача мобильной фазы снизу колонки. При определенной скорости, превышающей некоторую критическую, гранулы сорбента начинают подниматься потоком жидкости, расстояние между ними увеличивается. Определенное распределение гранул по размеру и весу позволяет создать расширяющийся слой, в котором гранулы если и не полностью неподвижны, то перемещаются лишь вблизи некоторого фиксированного положения. Режим течения подвижной фазы через такую колонку мало отличается от режима реального вытеснения. Ключевое достоинство РС-хроматографии – возможность непосредственно наносить на колонку неосветленный гомогенат клеток или даже клеточную суспензию, если очищаемый белок секретируется непосредственно в культуральную жидкость. В обзоре обсуждаются успехи, достигнутые при очистке белков с помощью РС-хроматографии, выпускаемые коммерческие системы, а также возможность использования обычного оборудования для жидкостной хроматографии белков в режиме PC.