БИОХИМИЯ, 1998, том 63, вып. 5, с. 708–715
УДК 577.152
Влияние pH на стабильность анионной пероксидазы табака и ее взаимодействие с перекисью водорода
Поступила в редакцию 23.10.1997
После доработки 20.11.1997
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: кальций, магний, вератровый спирт, модель структуры, лигнинпероксидаза, холофермент, стабильность.
Аннотация
Изучено влияние экстремально кислых pH на стабильность холоферментов пероксидазы табака и лигнинпероксидазы. Продемонстрирована стабилизация холофермента пероксидазы табака при рН<2 в присутствии катионов кальция и лигнинпероксидазы при рН>2 в присутствии вератрового спирта. Зависимость константы скорости взаимодействия пероксидазы табака от pH позволяет предполагать, что титрование группы с рК около 2,5 контролирует скорость реакции. Модельная структура пероксидазы табака, построенная методом гомологичного моделирования на основе первичной последовательности пероксидазы табака и координат кристаллической структуры пероксидазы арахиса, демонстрирует присутствие отрицательно заряженного остатка Glu-141на входе в активный центр и его электростатическое отталкивание от пропионатов гемина и триады остатков Asp- 76, 79, 80. Относительная стабильность пероксидазы табака при pH 1,8 в присутствии катионов кальция и характер зависимости константы скорости взаимодействия фермента с перекисью водорода позволяют предполагать, что протонирование фермента при наличии катионов кальция в среде приводит к формированию ионных связей между катионом кальция и Glu-141и пропионатами гемина и/или триадой остатков аспарагиновой кислоты, закрывающих доступ в активный центр пероксидазы и способствующих стабилизации холофермента.