БИОХИМИЯ, 1998, том 63, вып. 2, с. 235–239
УДК 577.152.3
Выделение и первичная характеристика уридинфосфорилазы из Salmonella typhimurium
Поступила в редакцию 07.08.1997
После доработки 26.09.1997
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: Salmonella typhimurium, уридинфосфорилаза, выделение, характеристика.
Аннотация
С помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) клонирован структурный ген udp хромосомы S.typhimurium, кодирующий синтез уридинфосфорилазы (УФазы), и обеспечена его суперэкспрессия в клетках Е.coli. Проведена очистка УФазы S. typhimurium до гомогенного состояния и изучены некоторые физико-химические свойства фермента. Молекулярная масса одной субъединицы УФазы составляет 2 7 ,5 кДа, а оптимум pH активности находится в пределах 7,2-7,4. Фермент состоит из шести идентичных субъединиц, и его молекулярная масса составляет около 165 кДа. По этим параметрам УФаза S.typhimurium сходна с УФазой Е. coli.В то же время по чувствительности к изменению полярности среды и субстратной специфичности эти ферменты существенно различаются. УФаза S.typhimurium фосфорилирует тимидин, дезоксиуридин и 5′-фтори 5′-бромсодержащие аналоги нуклеозидов значительно более эффективно, чем УФаза Е.coli.