БИОХИМИЯ, 1996, том 61, вып. 12, с. 2165–2172
УДК 577.152.3
Фотостимулирование внутримолекулярного переноса электрона в нитрогеназе
Поступила в редакцию 27.06.1996
После доработки 11.07.1996
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: нитрогеназа, Fe-белок, Mo-Fe-белок, эозин, кинетическая лазерная спектроскопия, импульсный фотолиз.
Аннотация
С использованием лазерной спектроскопии и фотохимической донорной системы эозин-NADH исследована реакция фотовосстановления нитрогеназы (Fe-бeлок окисл•Mo-Fe-белoк)-MgATP [(АV2 окисл •AV1)• MgАТР] в интервале 0-100 мс. Зарегистрированы две первоначальные стадии оборота нитрогепазы: фотовосстановление Av2 и перенос электрона с Av2вoccт. на Avl, Исследована кинетика фотовосстановления Av2 в растворе и в комплексе с Avl при концентрации эозина до 8-КГ5 М. Определены константы скорости второго порядка двух последних реакций (1,06•10^7 ±1,06•10^6 и 1,12•10^7±1.12•10^6 М-1•с-1 соответственно) и изучены сопутствующие этим реакциям процессы. Подтверждено, что в отличие от другого донора электронов (дитионита) фотохимическая донорная система восстанавливает Av2 в комплексе так же эффективно, как и в свободном состоянии в растворе. Константа скорости реакции переноса электрона с Av2вoccт. на Av1 составила 1,0•10^2 с-1 при 20°, что соответствует скорости этой реакции в случае Av2, восстановленного дитионитом. Сделай вывод, что определяющая скорость стадия оборота нитрогепазы при использовании фотохимической донорной системы не связана ни с переносом электрона с Av2воccт. на Av1.