БИОХИМИЯ, 1996, том 61, вып. 12, с. 2131–2139
УДК 577.152.1
Множественные молекулярные формы алкогольоксидазы метилотрофных дрожжей Pichia methanolica
Поступила в редакцию 10.06.1996
После доработки 10.07.1996
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: метилотрофные дрожжи, алкогольоксидаза, изоферменты.
Аннотация
У выделенной из Pichia methanolica МН4 алкогольоксидазы (АО) обнаружено девять молекулярных форм. При использовании комбинации методов ионообменной ВЭЖХ и препаративного электрофореза в неденатурирующих условиях выделены, очищены и частично охарактеризованы индивидуальные формы АО, имеющие идентичные молекулярные массы, но различающиеся по заряду (pI 5,2—4,2), Кт по метанолу (0,5-6,5 мМ) и содержанию mFAD (78,7-18,1%). Количественное соотношение изоформ АО существенно и воспроизводимо меняется по фазам периодического роста и при изменении скорости роста в хемостатном режиме. В начале экспоненциального роста при периодическом культивировании или высоких скоростях роста при хемостатном культивировании в клетках преобладает наиболее электрофоретически подвижная форма фермента, а в конце стационарной фазы или при малых скоростях хемостатного культивирования – малоподвижная форма. Обсуждаются возможные механизмы образования множественных форм АО и их функциональная роль.