БИОХИМИЯ, 1996, том 61, вып. 10, с. 1837–1847
УДК 577.152.3
Две сайт-специфические эндонуклеазы из термофильного штамма Bacillus species OV
Поступила в редакцию 01.04.1996
После доработки 03.06.1996
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: системы модификации-рестрикции, сайт-специфические эндонуклеазы, изошизомеры Eam1105I и СlaI, термофильные бактерии.
Аннотация
Из термофильного штамма Bacillus species OV выделены две сайт-специфические эндонуклеазы ВspOVI и BspOVII. Наибольшая активность у обоих ферментов наблюдается при 48° и не зависит от присутствия S -аденозил-L-метионина и AТР, BspOVI узнает последовательность 5′-gacnnn↓nngtc-3 ‘ 3′-CTGNN↑NNNCAG-5’ и разрезает ее, как показано стрелками, следовательно, является изошизомером Еаm 1105I и относится к подклассу IIN эндонуклеаз. BspOVI обладает повышенной стабильностью при хранении. Фермент может быть использован в создании Т-векторов для прямого клонирования продуктов PCR. BspOVII узнает и разрезает последовательность следовательно, является изошизомером ClaI. BspOVII блокируется метилированием аденина в сайте узнавания.