БИОХИМИЯ, 1996, том 61, вып. 10, с. 1772–1778
УДК 577.355.2
Свойства прочно связывающего нуклеотиды центра сопрягающего фактора хлоропластов, дефицитного по δ- и ε-субъединицам
Поступила в редакцию 16.01.1996
После доработки 14.06.1996
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: сопрягающий фактор хлоропластов, нуклеотидсвязывающие центры, рН-зависимость, гидролиз АТР.
Аннотация
При субстехиометрических соотношениях нуклеотидов и фермента изучено влияние pH среды инкубации на кинетику взаимодействия [14C]ADP и [14С]АТР с сопрягающим фактором хлоропластов, дефицитным по δ – и ε-субъединицам (CF1- δε). Снижение pH с 8,0 до 6,0 приводит к многократному увеличению скорости и степени прочного связывания АТР, в то время как связывание ADP с ферментом изменяется незначительно. Снижается скорость гидролиза прочно связанного АТР. Замедляется диссоциация АТР и несколько ускоряется диссоциация ADP. В составе продуктов диссоциации заметно возрастает содержание АМР. Показано, что АМР является продуктом гидролиза ADP. Проведенные на основании полученных данных расчеты позволяют заключить, что подкисление среды инкубации до pH 6,0 вызывает 200-кратное увеличение сродства прочно связывающего нуклеотиды центра CF1-δε к АТР, и примерно 3,5-кратное, снижение сродства к ADP. Предполагается, что изменение сродства и избирательности центра к нуклеотидам определяются протонированием/депротонированием специфических кислотно-основных групп, локализованных в пределах α -γ-субьединиц CF1; протонироваиие этих групп стабилизирует связывание АТР, а депротонирование – ADP.