БИОХИМИЯ, 1996, том 61, вып. 9, с. 1714–1724
УДК 577.152.361
Очистка и характеристика полифосфатазы цитозоля дрожжей Saccharomyces cerevisiae
Поступила в редакцию 06.05.1996
После доработки 10.06.1996
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: полифосфатаза, цитозоль, дрожжи, очистка, специфичность, ингибиторы.
Аннотация
Из цитозоля дрожжей Saccharomyces cerevisiae получен гомогенный препарат полифосфатазы с удельной активностью 283 Е на 1 мг белка, со степенью очистки 3540 раз и выходом 3,8%. Полифосфатаза является мономерным белком с молекулярной массой ~ 40 кДа. Фермент гидролизует полифосфаты разной степени полимерноcти, включая и триполифосфат, и практически неактивен в отношении АТР, РРi, и n-нитрофенилфосфата. Полифосфатаза наиболее активна при 50° и pH 6,5-8,5. Активность фермента возрастает в 8-66 раз в присутствии некоторых катионов двухвалентных металлов, которые по их активирующему влиянию можно расположить в следующем порядке: Со2+ > Mn2+ > Mg2+ > Zn2+ > Fe2+. С Са2+ и Сu2+ полифосфатаза неактивна. Эффективными ингибиторами полифосфатазы цитозоля являются гепарин, антитела к очищенной полифосфатазе клеточной оболочки, а также Сu2+ и Zn2+ в присутствии Mg2+. Полифосфатаза цитозоля обнаруживает значительное сходство с очищенной полифосфатазой клеточной оболочки, но отличается от полифосфатаз вакуолей, ядер и митохондрий этого же организма по ряду свойств.