БИОХИМИЯ, 1996, том 61, вып. 8, с. 1366–1374
УДК 577.122
Антигенное строение Pro-богатого участка 536-566 пертактина (p.69) Bordetella pertussis. II. Анализ пептид-специфичных антител.
Поступила в редакцию 27.03.1996
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: Bordetella pertussis, пертактин, синтетические пептиды, В-эпитопы.
Аннотация
Разработан неизотопный метод, позволяющий анализировать субпопуляции пептид-специфических поликлональных антител (АТ) без их предварительного выделения. Проведен анализ В-эпитопов, распознаваемых кроличьими АТ на синтетических пептидах KAPPAPKPAPQPGPQPP (17Р), QPPQPQPEAPAPQP (14P) и GPQPPQPPQP (10Р) из Рrо-богатой области 536-566 пертактина возбудителя коклюша. Для исследования антигенного строения были использованы методы непрямого и конкурентного ИФА, иммуноаффинная хроматография, изоэлектрическое фокусирование и иммуноблоттинг. Показано, что АТ ко всем трем пептидам распознают нативный Р.69. АТ к 14Р, распознающие антигенную детерминанту (АД) в районе QPEPAPQP, представлены двумя основными субпопуляциями АТ. АТ к 10Р взаимодействуют с двумя перекрывающимися В-эпитопами GPQPPQPQP и QPPQP. Найдено, что АТ к 17Р распознают эпитоп в районе KAPPAPKPAPQ и еще две перекрывающиеся антигенные детерминанты PGPQPP и PQPP. Минимальная последовательность, которая распознается АТ к 17Р – PQPP, но не QPP. АТ к 17Р представлены приблизительно 20 основными субпопуляциями, шесть-семь из которых эффективно взаимодействуют с С-концевым участком PGPQPP (6Р).