БИОХИМИЯ, 1996, том 61, вып. 7, с. 1189–1197
УДК 577.152.3
Влияние диэлектрической проницаемости среды инкубации на кинетику реакции гидролиза атр, катализируемой Са2+-транспортирующей атразой, солюбилизированной из плазматической мембраны гладкомышечных клеток
Поступила в редакцию 16.11.1995
После доработки 25.03.1996
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: Ca 2+, Mg2+-ATPаза, кальциевый насос, плазматическая мембрана, гладкая мышца, диэлектрическая проницаемость, ионная сила.
Аннотация
В опытах, проведенных на препарате солюбилизированной из плазматической мембраны клеток миометрия транспортной Са2+,Мg2+-АТРазы, очищенной с использованием метода аффинной хроматографии на кальмодулин-сефарозе 4В, изучено влияние диэлектрической проницаемости среды инкубации на кинетические пара-метры АТР-гидролазной реакции, катализируемой этим ферментом. Показано, что повышение концентрации диметилсульфоксида, этанола, ацетона и диоксана до 10 % приводит к различному по своей эффективности дозозависимому торможению реакции ферментативного гидролиза ATP. Независимо от природы используемых органических растворителей связь между удельной активностью (А) Ca2+,Mg2+-АТРазы и диэлектрической проницаемостью (D) среды инкубации хорошо аппрок-симировалась одной и той же линейной зависимостью, представленной в координа-тах Лейдлера-Скетчарда: inA;l / D. Снижение полярности инкубационной среды (изменение D в диапазоне 73,05-68,80) вызывает уменьшение начальной максимальной скорости ферментативной реакции по АТРи Mg2+ и увеличение кажущейся константы Михаэлиса по этим реагентам. В то же время уменьшение ионной силы среды инкубации со 100 до 25 мМ КСl индуцирует снижение начальной максимальной скорости АТР-гидролазной реакции по Ca2+и увеличение кажущейся константы Михаэлиса по этому катиону. Полученные данные обсуждаются, исходя из пред-ставлений о структуре активного центра транспортной Са2+,Мg 2+-АТРазы.