БИОХИМИЯ, 1996, том 61, вып. 6, с. 1119–1132
УДК 577.152.344
Выделение и свойства сериновой протеиназы PC камчатского краба Paralithodes самtschatica — протеолитического фермента широкой специфичности.
Поступила в редакцию 18.01.1996
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: сериновая протеиназа, аффинная хроматография, молекулярные свойства, субстратная специфичность, коллагенолитическое действие.
Аннотация
Из гепатопанкреаса камчатского краба Paralithodes camtschatica, сочетанием аффинной хроматографии на аргинин-агарозе и ПТГ-сефарозе и ионообменной хроматографии на Mono Q с выходом 68% выделена гомогенная сериновая протеиназа PC. Протеиназа полностью ингибируется специфическим ингибитором сериновых протеиназ диизопропилфторфосфатом. Молекулярная масса протеиназы 29 кДа, pi 3,0. Оптимум pH, определенный по расщеплению Glp-Phe-Ala-pNA -7,5, Кm = – 0.83 мМ, Кcat – 67 с- 1, температурный оптимум – 47-55°, фермент стабилен при pH 4-9. Протеиназа PC обладает широкой субстратной специфичностью, эффективно расщепляя пептидные связи, образованные карбоксильными группами гидрофобных аминокислот, а также аргинина и лизина в пептидах и белках, включая фибрин и коллаген. N-Концевая последовательность IVGGQEATP па 90% совпадает с аналогичной последовательностью коллагенолитических сериновых протеиназ других видов крабов.