БИОХИМИЯ, 1996, том 61, вып. 6, с. 1078–1087
УДК 577.152.2
Цитозиновая ДНК-метилтрансфераза из проростков пшеницы.
Поступила в редакцию 29.11.1995
После доработки 13.02.1996
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: метилирование ДНК, ДНК-метилтрансфераза.
Аннотация
Из ядер проростков пшеницы выделена и с помощью последовательной хроматографий на ДЭАЭ-целлюлозе, гепарин-сефарозе и Mono Q FPLC очищена цитозиновая ДНК-метилтрансфераза. Удельная активность фермента составляет 236 ед/мг белка, а величина молекулярной массы по подвижности при Ds-Na-ПААГ электрофорезе равна 85000. Фермент способен к относительно длительному in vitro метилированию ДНК, однако в растворе в отсутствие субстратов он нестабилен. Величина кажущейся Кт для S-аденозил-L-метионина (SAM) равна 6 мкМ. Фермент активен в широком интервале pH (5,5-8,5); он ингибируется NaCl и продуктом реакции, S-аденозилгомоцистеином, с величинами [I] 50, равными 0,2 М и 12 мкМ соответственно. Фермент катализирует как de novo, так и поддерживающее метилирование ДНК и характеризуется высокой скоростью dе novo метилирования. По своим свойствам фермент из проростков пшеницы во многом сходен с известными растительными цитозиновыми ДНК-метилтрансферазами.