БИОХИМИЯ, 1996, том 61, вып. 5, с. 880–886
УДК 577.152.2
Обмен кофермента холотранскетолазы со средой
Поступила в редакцию 07.12.1995
После доработки 17.01.1996
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: транскетолаза, тиаминпирофосфат, дигидроксиэтилтиаминпирофосфат, обмен.
Аннотация
Дигидроксиэтилтиаминпирофосфат (ДТПФ) – промежуточный продукт транскетолазной реакции, добавленный извне, способен взаимодействовать как с апо-, так и с холотранскетолазой. Спектральные характеристики комплекса, образованного при добавлении ДТПФ к холотранскетолазе, резко отличаются от спектральных характеристик комплекса, образованного при добавлении ДТПФ к апотранскетолазе, но по существу не отличаются от спектральных характеристик естественного комплекса транскетолаза-ДТПФ, образованного в процессе транскетолазной реакции (при добавлении субстрата к холотранскетолазе). ДТПФ способен выполнять функцию субстрата в транскетолазпой реакции даже при использовании каталитических количеств холофермента. Полученные в работе экспериментальные данные указывают на то, что ДТПФ способен вытеснять кофермеит (тиаминпирофосфат) из холотранскетолазы, связываясь при этом с уже сформированным в результате предшествующего связывания тиаминпирофосфата, активным центром фермента. Депротонирование ДТПФ не является скорость-лимитирующей стадией транскетолазной реакции. Имеются два независимых пути обмена тиаминпирофосфата холотранскетолазы со средой.