БИОХИМИЯ, 1996, том 61, вып. 5, с. 871–879
УДК 577.152.3
Влияние специфических лигандов на тепловую инактивацию мышечной гликогенфосфорилазы b
Поступила в редакцию 27.11.1995
После доработки 03.01.1996
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: мышечная гликогенфосфорилаза, тепловая денатурация, аллостерические эффекторы.
Аннотация
Показано, что константа скорости термоинактивации (k) гликогенфосфорилазы b из скелетных мышц кролика уменьшается с ростом концентрации фермента. Этот эффект объяснен и рамках кинетической модели, включающей два параллельно протекающих процесса: денатурацию фосфорилазы b в растворе и денатурацию фермента, адсорбированного на стенках сосуда. Вклад второго процесса возрастает с уменьшением концентрации фермента. Продемонстрирован защитный эффект аллостерического активатора (АМР), аллостерических ингибиторов (глюкозо-6-фосфата и FMN) и конкурентного ингибитора (глюкозы) при тепловой денатурации фосфорилазы b. Количественный анализ зависимостей константы скорости k от концентраций АМР, глюкозо-6-фосфата и FMN позволил рассчитать микроскопические константы диссоциации комплексов фосфорилазы b с этими лигандами (0,34, 0,50 и 0,30 мМ соответственно). S-Образный характер зависимости константы скорости термоинактивации от концентрации глюкозы свидетельствует о существовании положительной кооперативности при связывании глюкозы с димерной молекулой фосфорилазы b (коэффициент Хилла равен 1,8).